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薄層層析(TLC)技術在生物堿中的應用介紹

薄層層析法(Thin Layer Chromatography)是一種微量分離方法,分離效果好,樣品用量少,靈敏度高,分析速度快,它不僅可以用于純物質的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。還可以通過薄層層析來摸索和確定柱層析時的洗脫條件。 
目前該技術廣泛應用于以下方面:1.藥品和制劑的質量控制和雜質檢查;2.化學反應進程的控制,反應副產(chǎn)物的檢查和中間體的分析;3.柱層析分離條件的探索;4.精制和制備;5.臨床和生化檢驗;6.毒物分析;7.中藥材品種的真?zhèn)螜z查和代用品的尋找;8.中草藥的成分分析和含量測定等。 
根據(jù)分離的原理不同,薄層層析可以分為兩類:用吸附劑鋪成的薄層所進行的層析為吸附薄層層析;用纖維素粉、硅膠、硅藻土為支持劑鋪成的薄層,屬于分配薄層層析。吸附薄層主要是利用吸附劑對樣品中各成分吸附能力不同,及展開劑對它們的解吸附能常不能得到準確的結果,因為水浸液中某些成分(如蛋白質、鞣質、力的不同,使各成分達到分離。吸附作用主要由于物體表面作用力、氫鍵、絡合、靜電引力、范德華力等產(chǎn)生。吸附強度決定于吸附劑的吸附能力,還受被吸附成分的性質影響,更與展開劑的性質有關。分配層析的一般原理:在展開過程中,各成分在固定相和流動相之間作連續(xù)不斷的分配,由于各成分在兩相間的分配系數(shù)不同,因而可以達到相互分離的目的。 
薄層層析法是將吸附劑在玻璃、金屬或塑料等光潔表面上均勻的鋪成薄層,之后點樣,以流動相展開。薄層色譜法屬于吸附色譜法的范疇,組分不斷的被吸附劑吸附,又被流動相解析而向前移動。由于吸附劑對不同組分有不同的吸附能力,因此在流動相向前移動的過程中,不同組分移動不同距離,使各組分根據(jù)吸附能力或分配系數(shù)的不同得到分離。 
張?zhí)m蘭[25]等利用薄層層析法對分離純化得到的鉤吻生物堿進行定性的鑒別。展開溶劑系統(tǒng)為氯仿:甲醇=94:6,對鉤吻總生物堿進行鑒別,得到較好的效果。 
張為民等利用薄層層析法對從苦豆子中提取的生物堿進行單體分離,展開溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯:乙醇:濃氨水=5:1:0.5,成功的對生物堿進行了單體的分離,并確定其中一個為苦參堿。姜典鎮(zhèn)等利用薄層層析法測定食品中阿片生物堿含量進行了研究,展開溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯:甲醇:氨水=85:5:2,準確的檢測了食品中阿片生物堿的含量。
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